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解析鼠抗黃曲霉毒素B1單克隆抗體中的黃曲霉毒素B1

 發布時間:2022-08-09    點擊量:253
  鼠抗黃曲霉毒素B1單克隆抗體中的黃曲霉毒素B1存在于谷物、堅果、棉花籽及其他食品或飼料中,具有很強的致癌性,對人和若干動物具有強烈的毒性,其毒性作用主要是對肝臟的損害。本抗體為黃曲霉毒素B1單克隆抗體,該抗體可應用于ELISA、膠體金、免疫親和柱層析等免疫檢測。
 
  黃曲霉毒素B1在自然界分布的黃曲霉中,約有20%的菌株能產生黃曲霉毒素。其中花生、玉米、黃豆及棉籽等作物與其副產品易感染黃曲霉毒素,含黃曲霉毒素量較多,食入后在動物體內主要存在于如肝臟、尿與糞便中。黃曲霉毒素是一種肝臟毒素,能引起肝細胞變質、壞死、出血;目前,黃曲霉毒素的酶聯免疫法,免疫膠體金法等檢測方法均需要黃曲霉毒素抗原抗體。
 
  黃曲霉毒素B1的合成方法
 
  (1)黃曲霉毒素半抗原合成
 
  20-100mg黃曲霉毒素溶于丙酮中,10%硫酸中,于60℃攪拌反應,3h后,蒸干丙酮,洗滌4次,蒸干后得到黃曲霉毒素半抗原。
 
  (2)黃曲霉毒素全抗原(人工抗原、*抗原、酶標抗原)合成
 
  將黃曲霉毒素半抗原與牛血清白蛋白偶聯得到免疫抗原。
 
  取60mg牛血清白蛋白溶于9.5mlPBS(0.01mol/L,pH5.0)溶液中,加入50微升室溫攪拌1h,用0.01mol/LPBS透析3天,每天換3次透析液,得到黃曲霉毒素與牛血清白蛋白的免疫抗原。
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